DOSBox von Diskettenimage booten

Ich glaube, DOSBox selbst kann das nicht. Wenn aber dein Betrübsystem oder eine entsprechend dazu installierte Software das Image mounten kann, könnte es auch so gehen. Dann müsstest du nur noch das entsprechende Verzeichnis in DOSBox mappen. Oder aber, du installierst DOS gleich einfach in eine VM und mountest das Disk-Image dort. Allerdings würde ich es dann ggf. sichern oder schreibschützen, denn die VM wird auf das Image wie auf eine nicht schreibgeschützte Disk einfach ggf. schreibend zugreifen.

in der .conf von dosbox befindet sich am Ende den Abschnitt [autoexec]

Dort dann entsprechend den gewünschten Autostart erzeugen.
IMGMOUNT dürfte da weiterhelfen